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近日，山東大學齊魯第二醫院靳斌教授團隊與李景新教授團隊在歐洲肝臟研究學會（EASL）的官方旗艦期刊Journal of Hepatology（中科院1區TOP期刊，IF：33）在線發表了最新研究成果《Restoration of N-glycosylation via leucine-activated leucyl-tRNA synthetase 1 overcomes chemoresistance in intrahepatic cholangiocarcinoma》。
文章解讀
研究成果
肝內膽管癌（ICC）是一種高度致死的肝惡性腫瘤，對化療反應率較低。雖然翻譯重編程已被認為是治療抵抗的典型特征，但其在ICC中的作用尚不清楚。
該研究闡明了亮氨酸驅動的亮氨酰-tRNA合成酶1（leucyl-tRNA synthetase 1，LARS1）通過選擇性翻譯上調N-糖基化水平，增敏肝內膽管癌化療療效的機制，為改善ICC化療抵抗提出治療新策略。
模式機理圖
研究方法
該項研究中使用潔特生物一次性PCR管進行RT-qPCR實驗，RT-qPCR實驗用于檢測LARS1、ALG3、RFT1、ALG12等基因的mRNA表達水平，是驗證基因表達變化的關鍵技術之一。
結果表明，亮氨酰-tRNA合成酶1（LARS1）在ICC中顯著下調，尤其在晚期腫瘤中，且與患者生存率呈正相關。通過多種ICC模型，發現LARS1在調控ICC化學治療抵抗中起關鍵作用。
驗證1
與相鄰的腫瘤周圍樣本相比，LARS1在mRNA和蛋白質水平上顯示出明顯的腫瘤組織減少。此外，低LARS1表達與患者生存率降低顯著相關。
驗證2
相關的補充圖S3B和S3C中，研究者使用RT-qPCR檢測了化療藥物處理對LARS1 mRNA表達的影響。有趣的是，盡管化療藥物導致LARS1蛋白水平下降，但其mRNA水平反而上升了，這表明LARS1的調控發生在轉錄后水平
驗證3
RNC-qPCR 和多聚核糖體分析表明：LARS1 基因敲低并未改變這些基因的總 mRNA 水平，但顯著降低了其轉錄速率，并且使轉錄本從多聚核糖體組轉移到單聚核糖體組。相比之下，野生型 LARS1 的過表達（而非催化活性缺失型）導致轉錄速率升高，并增加了多聚核糖體組的比例，這證實了 LARS1 的酶活性能夠增強這些 mRNA 的翻譯效率。
驗證4
亮氨酸處理（1.6 mM）時間依賴性地上調 LARS1 mRNA 和蛋白水平（圖8A,B；補充圖 S12A）
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一次性PCR管
潔特生物一次性PCR管優選符合USP Class VI標準聚丙烯（PP）原料制成，作為PCR擴增反應體系的承載物時可適應反復高低溫設定，對于低、中通量的PCR/qPCR實驗，一次性PCR管是理想的選擇。
規格：8聯管 單管
顏色：透明 白色
材質：聚丙烯（PP），符合USP Class VI標準
質量保障：無人源DNA，無RNase/DNase，無熱原，無PCR抑制劑，無ATP
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GMP潔凈車間生產
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